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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
所在地:三明市
更新時間:2024-03-27
產(chǎn)品簡介:
【精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)品 名】
精子五聯(lián)檢:精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)
【研發(fā)依據(jù)】
正常情況下,與精核DNA結合的堿性蛋白(核蛋白)將經(jīng)歷從組蛋白到魚精蛋白的自然成熟過程,這種成熟后的魚精蛋白對精子基因(DNA)具有特殊保護作用。
組蛋白被魚精蛋白逐漸取代的過程,稱之為精子核蛋白組型轉換,這種組型轉換具有重要的生理意義。但當核蛋白組型轉換異??梢鹉行圆挥蚺咛ピ缙谪舱哿鳟a(chǎn),其機理為:①精子DNA不穩(wěn)定且易受損傷而難以受孕;②一旦受精,由于核蛋白組型異常,精子核不能正常解聚,從而影響了雌雄原核的融合;③胚胎不能正常發(fā)育,造成胚胎夭折而流產(chǎn)。
【預期用途】
主要用于成年男性精子核蛋白的染色,以此評估成年男性精子成熟比例,可評價男性生育功能。
【試劑特點】無須特殊儀器,簡單、快速、準確。
【檢驗原理】
成熟精子的核蛋白成份為魚精蛋白,富含精氨酸和胱氨酸殘基;不成熟精子的核蛋白成份為組蛋白,富含賴氨酸殘基。酸性條件下,苯胺藍與賴氨酸殘基結合生成紫藍色化合物,從而指示不成熟核蛋白的存在,而核蛋白成熟的精子則染成紅色。
【組成成份】
試劑主要由苯胺藍、氧雜蒽、冰醋酸、磷酸鹽緩沖液等配制而成。
規(guī)格 組 份 | 20人份/盒 | 40人份/盒 |
A液(10×濃縮洗滌液) | 10ml×1瓶 | 20ml×1瓶 |
B液(固定液) | 5ml×1瓶 | 10ml×1瓶 |
C液(染色液) | 5ml×1瓶 | 10ml×1瓶 |
D液(10×濃縮洗脫液) | 10ml×1瓶 | 20ml×1瓶 |
E液(復染液) | 5ml×1瓶 | 10ml×1瓶 |
防脫載玻片 | 20片 | 40片 |
說明書 | 1份 | 1份 |
【樣本要求】液化后的新鮮精液標本
【操作方法】
1.試劑的準備
1)洗滌工作液的配制:A液(10×濃縮洗滌液)以蒸餾水10倍稀釋,4℃保存?zhèn)溆茫?/span>
2)洗脫工作液的配制:D液(10×濃縮洗脫液)以蒸餾水10倍稀釋,4℃保存?zhèn)溆谩?/span>
2.樣本準備
1)新鮮精液標本置于37℃恒溫水浴箱中*液化。
2)精子的洗滌及稀釋,方法如下: ①在Eppendorf管中加入0.2—0.5ml的精液和洗滌工作液1ml,以一次性吸管反復吹打精子數(shù)次后,2000轉離心5min,棄去上清液,保留管底精子沉淀團; ②在Eppendorf管中加入洗滌工作液1.5ml,以一次性吸管反復吹打精子數(shù)次后,2000轉離心5min,棄去上清液,保留管底精子沉淀團; ③再次重復②的操作,離心結束后,棄去上清液。④在Eppendorf管中加入洗滌工作液約0.1—0.2ml,混合精子懸液。
3.檢測步驟
1)取上述已制備好的精子懸液15μl,均勻涂布于防脫載玻片上,自然干燥。
2)在涂有待測精子的涂片區(qū)內(nèi),滴加B液(固定液)2—3滴,室溫反應2min。
3)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子),甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。
4)在涂有待測精子的涂片區(qū)內(nèi),滴加C液(染色液)2—4滴,室溫反應5min。
5)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子),并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。
6)將載玻片豎直插入已盛有洗脫工作液的反應池中,使待測標本涂片區(qū)*浸沒于洗脫工作液中,室溫反應5min。
7)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子),并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。
8)在涂片區(qū)內(nèi)滴加E液(復染液)2—4滴,室溫反應5min。
9)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區(qū)內(nèi)的精子),迅速吹干玻片。(如果需要長久保存該涂片樣本,可選擇完成以下脫水步驟:分別將組織片依次置于70%、90%和100%乙醇中各2min,晾干。)
10)鏡檢。
【染色結果】
核蛋白不成熟的精子染色呈紫藍色或紫色,核蛋白成熟的精子染色呈紅色。
【參考值】 DFI(單鏈DNA精子)<10%為正常;當DFI>25%時,受精率<20%。
【注意事項】
1.受試者應按照WHO技術規(guī)范采集精液標本。
2.若精液標本粘稠度高或液化不*,可導致檢測結果非特異性假陽性。需要預先降低精液粘度或促進精液*液化后,才能用于檢測。
3. 精子密度過高可能導致脫色不均勻,從而對檢測結果產(chǎn)生不良影響;精子密度過低則不會影響檢測結果;涂片時應避免涂布過于稠密。
4. 精子洗滌不充分可影響顯微鏡觀察結果。
5. 染紫藍色精子為核蛋白不成熟精子,染紅色精子為核蛋白成熟的精子。由于精子核蛋白存在組蛋白-魚精蛋白的過渡期,因此此類精子頭部呈淡藍色或紫色;精子頭部局部染淡藍色或紫色、頂體膜邊緣染紫藍色,均是精子不夠成熟的表現(xiàn)。
6. 鏡下觀察結果時,不要在精子堆集分布的區(qū)域計數(shù),應選擇精子散在分布的區(qū)域進行計數(shù)。
7. 受檢者所有樣品均應視為潛在的傳染源,檢測完畢的樣本、試劑均須作為醫(yī)療廢物處理,避免污染環(huán)境。
8.精子核蛋白染色試劑盒為體外診斷試劑,檢測結果僅供臨床參考,對患者的臨床管理應結合其癥狀/體征、病史、其它實驗室檢查及治療反應等情況結合考慮。
【基本信息】
產(chǎn)品注冊證號:閩明食藥監(jiān)械(準)字2013第1400022號
執(zhí)行產(chǎn)品標準:YZB/閩明0034-2013
醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證號:閩食藥管械生產(chǎn)許第20110297號
規(guī) 格:20人份/盒、40人份/盒
存儲條件及有效期:試劑盒于2-8℃避光保存,有效期12個月。
【附錄】
影響精子受精或男性不育的因素
1.精子死亡率過高
2.精子畸形率過高
3.精子成熟率過低
4.精子染色體異常
5.精子數(shù)量過少
6.精子活動力過低
7.精子液化能力過低
三明市和眾生物技術有限公司——生殖醫(yī)學檢測試劑盒系列
1、精子DNA檢測試劑盒
2、精子DNA碎片檢測試劑盒
3、精子活性檢測試劑盒
4、精子形態(tài)學檢測試劑盒
5、精子核蛋白檢測試劑盒
五項聯(lián)合檢測,診斷分析精子的受精及生育能力,無須儀器,簡單、快速、準確,不孕不育科的*診斷方案。